|
ЛІКУВАННЯ ІНТОКСИКАЦІЙ УДК 615.9: 616.36-099:576.2.24:577.161.3 Л.Б. Бондаренко, д.б.н., А.К. Воронина, к.б.н., В.Н. Коваленко, д.б.н. ВЛИЯНИЕ ВИТАМИННОЙ КОМПОЗИЦИИ "МЕТАВИТ" НА ЛИПИДНЫЕ КОМПОНЕНТЫ МЕМБРАН МИТОХОНДРИЙ И ЭНДОПЛАЗМАТИЧЕСКОГО РЕТИКУЛУМА КЛЕТОК ПЕЧЕНИ В УСЛОВИЯХ ОСТРОГО ОТРАВЛЕНИЯ ПАРАЦЕТАМОЛОМИнститут фармакологии и токсикологии АМН Украины, г. Киев Введение Гепатотоксический эффект парацетамола, широко распространенного анальгетического и жаропонижающего средства, обусловлен не только ковалентным связыванием его высокореактивного метаболита N-ацетил-4-бензохинонимина с макромолекулами гепатоцитов [1], но и оксидативным стрессом, возникающим вследствие активации свободнорадикальных процессов [2]. В результате накопления продуктов перекисного окисления липидов в клетках нарушается количественный и качественный состав мембран клеточных органелл и изменяется активность различных ферментных систем [3]. Использование антиоксидантов с мембраностабилизирующей активностью позволяет уменьшить эти нарушения [3]. Целью данной работы являлось изучение возможностей коррекции изменений в составе липидного компонента мембран митохондрий и эндоплазматического ретикулума клеток печени, а также активности 5'-нуклеотидазы сыворотки крови в условиях острого отравления парацетамолом с помощью витаминной композиции "Метавит". Материалы и методы исследования В экспериментах использовали белых крыс-самцов (масса тела 160—170 г), которых содержали на стандартном рационе вивария. Методом рандомизации крыс распределили на 4 группы (не менее 6 животных в каждой): Через 20 ч после последнего введения парацетамола крыс умерщвляли методом цервикальной дислокации. Для дальнейших исследований отбирали сыворотку крови и печень, которую гомогенизировали в 0,05М Митохондриальную и микросомальную фракции получали по общепринятому методу с использованием дифференциального центрифугирования [5]. Липидные экстракты органелл получали по модифицированному методу Фолча [6]. Содержание различных фракций холестерина определяли по методу [6], основанному на их взаимодействии с хлористым железом, уксусной и серной кислотами. Коэффициент этерификации, являющийся важным показателем функционального состояния печени, представляли как отношение эфирносвязанного холестерина к общему [6]. Состав общих фосфолипидов определяли по [6]. В сыворотке крови крыс определяли активность 5'-нуклеотидазы [7], белок — по Лоури [8]. Статистическую обработку данных проводили по общепринятым методам. Результаты и их обсуждение Полученные результаты свидетельствуют (рис. 1, 2, 3), что в условиях острого отравления парацетамолом интенсификация процессов перекисного окисления липидов в мембранах органелл клеток печени ведет к изменениям их липидного состава. Из рис. 1 видно, что в митохондриях клеток печени крыс, отравленных парацетамолом, достоверно возрастали уровни свободного и общего холестерина (на 103 и 67% соответственно). В мембранах эндоплазматического ретикулума был отмечен аналогичный характер изменений содержания холестерина. При этом коэффициент этерификации снижался как в митохондриях (от 0,503 у интактных животных до 0,390 — у получавших парацетамол крыс), так и в мембранах эндоплазматического ретикулума (0,35 и 0,32 соответственно). Эти изменения могут быть прямым следствием интенсификации процессов перекисного окисления липидов [3]. Введение животным витаминной композиции "Метавит" позволило нормализовать как содержание различных фракций холестерина в субклеточных мембранах, так и коэффициент этерификации (до 0,590 в митохондриях и до 0,55 в мембранах эндоплазматического ретикулума). Использование одного метионина не оказывало существенного влияния на данные показатели. Следует отметить, что отравление парацетамолом не приводило к серьезным изменениям содержания фосфолипидов в митохондриях клеток печени (рис. 3). В мембранах эндоплазматического ретикулума была заметна тенденция к снижению содержания фосфолипидов, что, очевидно, является следствием подавления их биосинтеза продуктами перекисного окисления липидов и нарушения функционирования соответствующих ферментных систем [3, 9]. Использование витаминной композиции "Метавит" и метионина вело к дальнейшему снижению содержания фосфолипидов, что может быть обусловлено влиянием данных препаратов на активность некоторых ферментов их обмена [10—12]. Одним из таких ферментов, участвующим в процессах фосфорилирования, дефосфорилирования и переноса фосфатных групп с одного субстрата на другой, является 5'-нуклеотидаза [12]. Эффект парацетамола на фосфолипидный компонент мембран может быть опосредован и его влиянием на этот фермент, рассматриваемый также и в качестве маркера процессов холестаза (рис. 4). Токсическое поражение печени парацетамолом, вероятно, сопровождается переходом мембраносвязанной формы данного фермента в цитозоль также, как это было показано ранее при токсическом гепатите, вызванном тетрахлорметаном [13]. При этом повышение активности 5'-нуклеотидазы можно рассматривать в качестве компенсаторного ответа организма на введение парацетамола, поскольку образующийся в результате данной ферментативной реакции аденозин является эффективным эндогенным гепатопротектором [14]. Витаминная композиция "Метавит" и метионин нормализовали активность данного фермента, возможно, за счет влияния на обмен глутатиона [10, 11, 14]. Снижение активности 5'-нуклеотидазы в данных группах могло, в свою очередь, привести к торможению биосинтеза фосфолипидов (рис. 3). Таким образом, при остром отравлении парацетамолом отмечается изменение состава липидного компонента субклеточных мембран клеток печени и возрастание активности 5'-нуклеотидазы. Витаминная композиция "Метавит", в отличие от препарата сравнения метионина, оказала положительное влияние на изучаемые показатели. Литература |